赣州DNA亲子鉴定浅谈各种鉴定方法（多**位探针,单**位探针,PCR鉴定法,HLA亲子鉴定分析）

    1.多**位探针（multi-locusprobes）（MLP）MLP法是以一个探针（probes）可以检测出20~30条染色带（band）,亦即一次分析10~15个**位,以得到较多的鉴定讯息。然而究竟分析到哪一个**位亦未必明确。如果严谨地执行品质管理,则检查结果大体上还算稳定,但从**位无法被特定这-一点来看,MLP法未必适合于作DNA鉴定。不过,在仅有单亲或欠缺双亲的时候,将其作为推定与其他亲族血缘关系的鉴定方法,则是现在更能被信赖的方法。

    2.单**位探针（single-locusprobes）（SLP）SLP法因为是分析一个特定的**位,所以跟以往血液型一样可以用来作鉴定。但是,以限制酶切断的染色带片断通常有数千个碱基以上的长度,要严谨地确定其长度是有困难的。因此,一方面要考虑电泳的误差及凝胶（gel）的误差,另一方面推算片断大概的长度再判断染色带位置是否一致,然后统计出现的频率。判定染色带是否一-致、统计出现频率及确认突变几率等评估的方法,必须依学术上已确立者为之。

    3.藉由PCR法在迷你卫星（mini-satellite,亦即VNTR）及微小卫星（micro-satellite,亦即STR）DNA区域反应分析。

    这些是依PCR反应所扩增的**位来决定,而对偶**的检测法也要能够明确用来作鉴定。迷你卫星DNA重复的单位本身约有十至数十个碱基,总长如果太长并不适于PCR反应。因此,只有总长较短的**位才适于作PCR反应。一般而言,迷你卫星DNA虽然对偶**有很高的特异性,但是因为总长度稍长而有使PCR反应效率降低的危险。

    另一方面,微小卫星DNA重复单位为数个碱基,全长较短适于PCR反应。***般微小卫星DNA的对偶**数目不多,所以为了提高鉴别能力,组合使用数个**位是有必要的。

    虽然可以用组合阶梯标志（size-marker）来确定对偶**被扩增的DNA片断全长,但是如能用尸[以夕亍少-marker,则能更正确地确定长度。虽然有时可以看到不规则的对偶**与尸[少久亏夕-marker不一致的情形,但是希望使用不规则对偶**出现频率较低的**位。再者,出现不规则对偶**时进行全面性的检索,一般是不可避免的,其表示之方法有明示的必要。

    4.HLA分析

    HLA原本是一-种白血球的血液型,用其抗体型别来作鉴定。以DNA来作鉴定虽然有较多的对偶**能够正确地判定出型别,惟基本上其与判定血液型相同,都可作为鉴定之用。在判定型别方面,有将PCR产物与限制酶反应作用后判定的方法,亦有用特定碱基序列探针的点墨杂交法等,不论何者均得利用之。

    5.其他PCR鉴定法

    以往的血液型鉴定用DNA更能详细地实行。例如,以ABO血液型为首及其他的血液型别等的DNA分析法已有报告出来,而**型也可以分析。这些都必须在遵循前述各项注意要点下才可使用。

    粒线体DNA的D-loop区有许多高变异的碱基序列,虽然有利用的可能,但因是母系遗传,并不适用于父子鉴定。

    利用PCR分析迷你卫星DNA重复单位（REPEAT）内变异的MVR-PCR法,虽然只被限于**位（locus）才能使用,但具有高度的分析能力,安康仍是相当有用的。然而,必须叙安康定品质管理的方法后才能被使用。

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